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北京细基百蕾生物科技有限公司(Cellgen Biolabs)是2007年创建的一家集生化试剂生产、研发与销售为一体的生物公司,本公司本着“高质量,优服务”的宗旨,自主研发了pSSB类载体产品,此载体用于构建可诱导、高水平表达的基因或基因片段,表达的融合蛋白的N端或C端带有SSB标签。融合蛋白进一步通过ssDNA-cellulose进行亲和层析纯化,从而达到高效纯化蛋白的目的。为蛋白纯化提供了一种新的亲和纯化体系,进一步拓宽了蛋白质纯化领域。
DNA单链结合蛋白(SSB, single-stranded DNA binding protein)由696bp核苷酸编码,分子量为25.6kDa。它与单链DNA有很强的亲和性,且与单链DNA协同结合,即一个SSB蛋白结合到单链DNA上,可以促进其它SSB蛋白与相邻单链DNA结合。利用这一特性,将SSB构建到不同宿主的表达载体中,可以实现在不同宿主中表达带有SSB标签的融合蛋白,从而与偶联在介质中的单链DNA高效、特异性结合,这种结合是可逆的,能够在温和、非变性的条件下通过改变洗脱液的pH值或盐浓度对融合蛋白进行洗脱,达到纯化的目的。
构建在一系列pSSB载体中的SSB蛋白来源于T7噬菌体,天然状态下为同源二聚体,结合在单链上,使DNA受到保护,不被酶水解,也不恢复成双链,且此蛋白与单链DNA的亲和性高且无序列特异性。SSB标签可根据需要由位点特异的蛋白酶切除,pSSB系列质粒上多克隆位点上游包含有肠激酶(enterokinase)、凝血酶、TEV等识别序列。带有标签的蛋白可以通过免疫学方法进行检测,同时根据实验需要决定是否切除标签。
SSB亲和层析介质(ssDNA-cellulose)是专门设计用于纯化SSB融合蛋白及与SSB有亲和作用的蛋白质分离介质,通过盐离子梯度洗脱可得到高纯度的SSB融合蛋白,纯化条件温和,不引入其他物质,能够保证蛋白的活性。
公司坚持低成本、高质量、低价格、优质的服务态度的路线,为客户创造价值,为精英人才提供实现自我的舞台,通过吸引人才和发展激励人才,实现员工个人和公司的双赢,同时帮助研究者更快更好地进行生命科学实验,推动生物学的发展。
近年公司又推出了质谱服务。Cellgen Biolabs拥有国际先进的高分辨质谱仪分析技术平台,具备蛋白质和小分子复杂混合物分离、质谱鉴定、复杂成分鉴定、蛋白质修饰位点分析、蛋白质定量等在内的高通量、高灵敏度和高分辨率的分析技术体系。公司由多名在质谱分析和蛋白质功能研究方面经验丰富的国内外专家领衔,拥有多名博士和硕士组成的具有化学、生物、医学专业背景的技术团队,在化学小分子、临床样本和科学研究等急需的质谱鉴定和分析服务方面积累了多年的经验,已成功分析超过5000多例复杂样品,相关测试数据和研究成果已经在国际知名SCI期刊上发表(如Cell, Mol & Cellular Proteomics, J Proteome Res, J Proteomics, Proteomics, JBC等)。
Cellgen Biolabs的服务优势:
•助力中国好科研,超低价服务科研工作者
•为科研工作者免费提供相关技术咨询
•一流的技术团队,超高的服务质量
•口碑好,用户评价极高
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