细胞凋亡系列产品
细胞凋亡(apoptosis)一般是指机体细胞在发育过程中或在某些因素作用下,通过细胞内基因及其产物的调控而发生的一种程序性细胞死亡(programmed cell death)。细胞凋亡对胚胎发育及形态发生(morphogenesis)、组织内正常细胞群的稳定、机体的防御和免疫反应、疾病或中毒时引起的细胞损伤、老化、肿瘤的发生进展起着重要作用,并具有潜在的治疗意义。
细胞凋亡途径中各事件的发生是有时序性的,即各事件按先后顺序依次发生,最终导致凋亡小体的出现,细胞随着发生凋亡。
其典型特征如下:
早期凋亡:细胞膜结构发生改变,磷脂酰丝氨酸外翻;
早中期凋亡:细胞质密度增加,线粒体膜电位消失细胞膜,通透性改变,释放细胞色素C到胞浆中;
中晚期凋亡:细胞凋亡信号转导;
晚期凋亡:DNA降解为180~200bp片段大小。
图1:细胞凋亡途径各时序性事件发生及检测方法
一、凋亡早期:Annexin-V/PI双染色法(PS在细胞外膜上的检测)
在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,细胞发生凋亡时,细胞膜发生变化,PS从细胞膜的内表面翻转到细胞膜的外表面。Annexin-V(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36 KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。用荧光素(FITC、Alexa Fluor488等)标记的Annexin-V作为探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜即可鉴别凋亡细胞和活细胞。
坏死的细胞PS同样也会从细胞膜的内表面翻转到细胞膜的外表面,Annexin-V也能识别坏死细胞表面的PS,所以Annexin-V无法区分坏死细胞和凋亡细胞。另外碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,能够与细胞内DNA结合,而且它不能透过完整的细胞膜。早期凋亡细胞和活细胞的细胞膜仍然完整,PI染料无法自由通过细胞膜进入细胞内与DNA结合,所以PI染料无法标记凋亡细胞和活细胞,而PI染料却能够通过坏死细胞的细胞膜与细胞内的DNA结合,坏死细胞内的PI染料被488nm激光激发后会发射红荧光,被相应通道接收。所以Annexin V和PI同时使用,就可以区分活细胞、早期凋亡细胞和坏死细胞。
图2:Annexin-V/PI双染色后流式检测结果分析
产品信息
货号 |
品名 |
规格 |
价格(元) |
促销价(元) |
40302ES20 |
20T |
480.00 |
366.00 |
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40302ES50 |
50T |
960.00 |
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100T |
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20T |
518.00 |
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